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1. 原理
凝聚胺(polymatching)法首先利用低离子介质降低溶液的离子强度,减少红细胞周围的阳离子云,促进血清(浆)中的抗体与红细胞相应抗原结合,再加入带亚电荷的高价阳离子多聚物-凝聚胺溶液,中和红细胞表面的负电荷,缩短细胞间距,形成可逆的非特异性聚集,并使IgG型抗体直接凝集红细胞。加入中和液后,仅由凝聚胺引起的非特异性聚集,会因电荷中和而分散,而由抗体介导的特异性凝集则不会分散。
2. 标本采集
2.1 标本种类:抽取静脉血3-4ml待凝固后分离血清,将细胞配成5%盐水悬液将供血者血样以同样方法分离血清(浆)和红细胞悬液。
2.2 标本要求:抗凝和干燥管均可,如用抗凝血主张用EDTAK2(mg/dz)抗凝标本应无溶血,切标签齐全。
3. 标本储存:急诊标本30分钟内完成操作,标本应至4℃冰箱保存7天。
4. 标本运输:室温运输。
5. 标本拒收标准:细菌污染。溶血标本,标签不齐全不能作测定。
6. 试剂: 6.1 试剂名称:凝聚胺试剂(polymatching) 6.2 试剂生产厂家:(台资)珠海贝索生物技术有限公司。 6.3 试剂组成:
试剂1. 低离子介质(LowLonic Medium,LIM)。试剂打开使用后,可置室温贮存,未开封者2-10度贮存,有效期为2年。 试剂2. 凝聚胺溶液(PolybreneSolution)。贮存及有效期同上。
试剂3. 重悬液(ResuspendingSolution)。贮存及有效期同上。
试剂4. 8.5%生理盐水。