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根据临床初步诊断及待检细菌的种类,可选用不同环境条件进行培养。为提高检验的正确率,有时同一标本同时采用两种或三种不同的培养法。
需氧培养法
本法是临床细菌室最常用的培养方法,适于一般需氧和兼性厌氧菌的培养。将已接种好的平板、斜面和液体培养基等,置于35℃温箱中孵育18-24小时,一般细菌可于培养基上生长,但有些难以生长的细菌需培养更长的时间才能生长。有些细菌最适生长温度是28-30℃,甚至4℃也能生长。
二氧化碳培养法
有些细菌初次分离培养时需置于5%-10%CO2环境才能生长良好,如脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、牛布鲁菌等。常以下列方法供给C02.
1.二氧化碳培养箱:是一台特制的培养箱,既能调节C02的含量,又能调节所需的温度。此法适于大型实验室应用。
2.烛缸法:将已接种好的培养基置干燥器内,并放人点燃的蜡烛。干燥器盖的边缘涂上凡士林,盖上盖子,烛光经几分钟后自行熄灭,此时干燥器内C02含量约占5%-10%,然后将干燥器放入35℃温箱内培养。
3.化学法:按每升容积加入碳酸氢钠0.4g和浓盐酸0.35ml的比例,分别置于容器内。将容器连同接种好的培养基都放人干燥器内,盖紧干燥器的盖子,倾斜容器使浓盐酸与碳酸氢钠接触生成CO2。
厌氧培养法
适用于专性厌氧菌和兼性厌氧菌的培养。
常用的厌氧培养法有:(1)疱肉培养基法;(2)焦性没食子酸法;(3)厌氧灌法;(4)气袋法;(5)厌氧手套箱法。