在其他因素不变的情况下，底物浓度的变化对反应速率的影响。作图呈双曲线型，即当底物浓度很低时，反应速度（V）随着底物浓度（[S]）的增高，成直线比例上升；随着底物浓度的进一步增高，反应速度的增加幅度逐渐减小；当底物浓度增加到一定量时，反应速度达到一最大值（Vmax），且不再随底物浓度的增加而增加。此时酶的活性中心已被底物饱和。