第二章 药物分析的基础知识

　　第一节 药品检验的基本知识

　　一、药品检验工作的程序

　　1.取样：应考虑取样的科学性、真实性和代表性。

　　样品总件数为X，n≤3，应每件取样n≤300，取样件数为 +1 n＞300，取样件数为 /2+1 2.检验：鉴别、检查、含量测定。

　　3.记录和报告：检验记录应有供试品信息、检验依据；取样、报告日期；检验项目、数据、结果；结论判定；检验者签字或盖章。

　　检验报告书内容有供试品信息，检验依据、取样、报告日期，检验结果、结论，检验者、复核者及有关负责人签名或盖章。

　　二、计量仪器认证的要求国家对社会公用计量标准器具、企业、部门用最高计量标准器具，以及列入强制检定目录的工作计量器具实行强制检定。其他计量标准器具，使用单位应当自行定期检定或送计量检定机构检定，县级以上政府计量行政部门监督检查。

　　三、常用分析仪器的使用和校正

　　1.分析天平称量的相对误差应小于千分之一，根据取样量选用感量0.1、0.01、0.001mg三种。

　　方法有减量法、增量法两种。

　　2.玻璃仪器容量瓶：允差为容积的千分之一移液管：100ml（±0.10ml）；50ml（±0.08ml）；25ml（±0.05ml）

　　滴定管：50ml（±0.05ml）；25ml（±0.03ml）；10ml（±0.02ml）；5ml（±0.01ml）

　　第二节 药物分析数据的处理

　　一、误差

　　1.真值 指某物理量客观存在的确定值，它通常是未知的。由于误差的客观存在，真值一般是无法测得的。

　　测量次数无限多时，根据正负误差出现的概率相等的误差分布定律，在不存在系统误差的情况下，它们的平均值极为接近真值。故在实验科学中真值的定义为无限多次观测值的平均值。

　　2.误差 测量值和真实值的偏离。误差越小，准确性越高（1）绝对误差：测量值和真实值之差。可以是正值，也可以是负值，其单位与测量值单位相同。

　　以χ代表测量值，μ代表真实值，绝对误差δ为：δ＝χ－μ（2）相对误差：误差在测量值中所占比例，相对误差没有单位，便于比较。

　　相对误差＝绝对误差/真实值×100%

　　3. 误差的分类根据误差的性质和产生的原因，可将误差分为系统误差、随机误差（偶然误差）二类。

　　4.根据误差的性质，系统误差可分为方法误差、仪器误差、试剂误差、操作误差等。

　　5.误差的性质、产生原因及减小或消除的方法：

　　 ①仪器误差
　　误差性质：分析过程中由于某些恒定的或按一定规律起作用的因素所形成的误差。相同条件下作平行测定。
　　产生原因：由于仪器或工具本身不精密而造成，即指示的数值不准确。
　　减小或消除方法系统误差：校正仪器，采用校正值。

　　②试剂误差
　　产生原因：试剂纯度不够或标定欠准确。
　　减小或消除方法系统误差：进行空白试验，采用高纯度试剂，准确予以标定。

　　③方法误差
　　误差性质：测定时必然会重复出现，使测定结果系统偏高或偏低。可通过实验设法减小。决定测试的准确度。
　　产生原因：测定的方法本身不完善，如反应不完全或有副反应，计算公式不完全符合真实情况等
　　减小或消除方法系统误差：采用标准方法与所用方法进行对照。

　　④操作误差
　　产生性质：由于操作人员的主观偏见或视觉辨别能力差，以及操作不当而造成的，如滴定时读数方法，滴定终点的判断等。
　　减小或消除方法系统误差：严格训练，提高操作人员的技术水平。

　　⑤随机误差：
　　误差性质：在测试过程中一系列的有关因素微小的随机波动而形成的，不可避免且无法校准的，决定分析结果的精密度。
　　产生原因：由偶然的、难以预料的和无法控制的因素而造成，如环境温度波动、空气湿度、气压的变化等。
　　减小或消除方法系统误差：对同一试样进行多次重复测量，如已对系统误差进行校准，则多次测量的平均值将接近真实值。

　　二、有效数字

　　1.有效数字：实验测量中所使用的仪器仪表只能达到一定的精度，因此测量或运算的结果不可能也不应该超越仪器仪表所允许的精度范围。分析工作中实际能测量到的数字称为有效数字，只能具有一位存疑值。

　　有效数字的表示：应注意非零数字前面和后面的零。0.009140km前面的三个零不是有效数字，它与所用的单位有关。非零数字后面的零是否为有效数字，取决于最后的零是否用于定位。

　　2.有效数字的修约：

　　（1） 四舍六入五成双；

　　（2） 只允许对原测量值一次修约至所需位数；

　　（3） 运算过程中可多保留一位有效数字，计算出结果后再修约至应有有效数字位数。

　　3.运算法则

　　（1）加、减法运算有效数字进行加、减法运算时，按照小数点后位数最少的保留其他个数位数。

　　（2）乘、除法运算两个量相乘（相除）的积（商），其有效数字位数与各数中有效数字位数最少的相同。

　　第三节 药品质量标准分析方法的验证

　　一般常用的分析效能评价指标包括：准确度、精密度、专属性、检测限、定量限、线性与范围、耐用性等；测定法的效能指标可评价分析测定方法，也可作为建立新的测定方法的实验研究依据。

　　1.准确度 是指测得结果与真实值接近的程度，表示分析方法测量的正确性。

　　由于“真实值”无法准确知道，因此，通常采用回收率试验来表示。

　　制剂的含量测定时，采用在空白辅料中加入原料药对照品的方法作回收试验及计算RSD.回收率＝测定值/加入量×100％

　　2.精密度 系指用该法测定同一匀质样品的一组测量值彼此符合的程度。它们越接近就越精密。在药物分析中，常用标准偏差（SD或S）； 相对标准偏差（RSD），也称变异系数（CV）表示。

　　3.专属性 是指在样品介质中有其他组分共存时该分析方法对供试物质准确而专属的测定能力。

　　4.检测限 是指分析方法能够从背景信号中区分出药物时，所需样品中药物的最低浓度，无需定量测定。

　　当用仪器分析方法时，可用已知浓度的样品与空白试验对照，记录测得的被测药物信号强度S与噪音（或背景信号）强度N，以能达到S／N＝2或S／N＝3时的样品最低药浓为检测限。

　　5.定量限 是指在保证具有一定可靠性（一定准确度和精密度）的前提下，分析方法能够测定出的样品中药物的最低浓度。

　　它反映了分析方法测定低药物浓度样品时具有的可靠性。用仪器分析方法时，则往往将多次空白试验测得的背景响应的标准差（即空白标准差）乘以10，作为定量限的估计值。

　　6.线性 在给定范围内测试结果与样品中供试物浓度成正比的程度。即是供试物浓度的变化与试验结果（或测得的响应信号）成线性关系。　　<医学教育网搜集整理>

　　7.范围 是指利用一种方法取得精密度、准确度均符合要求的试验结果，而且成线性的供试物浓度的变化范围，对于含量测定要求一般浓度上限为样品最高浓度的120％，下限为样品最低浓度的80％ （但应高于LOQ）。

　　8.耐用性 是指利用相同的方法在各种正常实验条件下对同一样品进行分析所得结果的重现程度。包括不同的实验室、不同的分析人员、不同的仪器、不同批号的试剂、不同的测试耗用时间、不同的分析温度、不同的测定日期等等。

　　评价一种分析方法的效能，一般根据方法的使用对象区别。有以下四种情况：

　　A.用于原料药中主要组分或制剂中有效组分含量测定的方法：除了检测限和定量限二项指标外，对精密度、准确度、选择性、线性与范围、耐用性等均应有所要求；

　　B.用于原料药中杂质测定或制剂中降解产物测定：①用于含量测定，除检测限不必要求外，对准确度、精密度、线性与范围、定量限、耐用性等均应有所要求；②用于限度检查，只对检测限、专属性和耐用性三项指标有所要求，其余均无需要求。