显微鉴定法是利用显微技术对中药进行显微分析,以确定其品种和质量的一种鉴定方法。显微鉴定主要包括组织鉴定和粉末鉴定,利用显微镜来观察药材的组织构造、细胞形状及内含物的特征、矿物的光学特性,和用显微化学方法,确定细胞壁及细胞执业药师,中药鉴定学,辅导,精华,内含物的性质或某些品种有效成分在组织中的分布等,用以鉴别药材的真伪与纯度甚至品质。
(一)显微制片方法
显微鉴定时可根据检品的不同情况制作相应的制片,包括横切片或纵切片、表面制片、粉末制片、解离组织片、花粉粒与孢子制片、磨片制片、含粉末药材的制剂显微纸片等。
制作解离组织片时,解离液选择原则为:如样品中薄壁组织占大部分,木化组织少或分散存在,可用氢氧化钾法;如果样品坚硬,木化组织较多或集成较大群束,可用硝铬酸法或氯酸钾法。
(二)植物细胞壁和内含物的鉴别
(1)细胞壁性质的鉴别:
①木质化细胞壁加间苯三酚试液显红色或紫红色。
②木栓化或角质化细胞壁加苏丹Ⅲ显橘红色至红色。
③纤堆素细胞壁加氯医`学教育网搜集整理化锌碘试液显蓝色或紫色。
④硅质化细胞壁加硫酸无变化。
(2)细胞内含物性质的鉴别:
①淀粉拉加碘试液显蓝色或紫色。
②糊粉粒加碘试液显棕色或黄棕色。加硝酸汞试液显砖红色。
③脂肪油、挥发油或树脂加苏丹Ш试液显橘红色、红色或紫红色。
④菊糖加10%α-萘酚乙醇溶液,再加硫酸显紫红色并很快溶解。
⑤黏液加钌红试液显红色。
⑥草酸钙结晶加稀醋酸不溶解,加稀盐酸溶解而无气泡医`学教育网搜集整理发生。加硫酸逐渐溶解,析出结晶。
⑦碳酸钙结晶(钟乳体)加稀盐酸溶解,同时有气泡发生。
⑧硅质加硫酸不溶解。
(三)显微测量
(四)显微常数测定
常见的显微常数主要有用于叶类鉴别的气孔数、气孔指数、栅表比、脉岛数和脉端数等。
(五)显微临时制片常用封藏试液
显微鉴定所用试剂包括水、稀甘油、甘油醋酸试液及水合氯醛试液。
(六)扫描电子显微镜和偏光显微镜的应用
扫描电镜已广泛应用于生物样品表面及其断面立体形貌的观察。偏光显微镜主要用于观察和分析矿物类中药的医`学教育网搜集整理光学性质。