指颗粒性抗原(细菌、细胞等)与相应的抗体,或可溶性抗原(亦可用抗体)吸附于与免疫无关的载体形成致敏颗粒(免疫微球)与相应的抗体(或抗原),在有适量电解质存在下,形成肉眼可见的凝集小块。
1.直接凝集反应(direct agglutination) 是颗粒性抗原又称凝集原与相应抗体直接结合所呈现的凝集现象,如红细胞和细菌凝集试验。主要有玻片法、试管法及微量凝集法。玻片法为定性试验,方法简便快速,常用已知抗体检测未知抗原,应用于菌种鉴定,分型及人红细胞ABO血型测定等;试管法通常为半定量试验,常用已知抗原检测待检血清中有无相应抗体及其相对含量,以帮助临床诊断和分析病情。例如临床实验室常用的诊断伤寒或副伤寒的肥达氏试验(Widal test);诊断布鲁氏菌病的瑞特氏实验(Wrig test)及诊断斑疹伤寒及恙虫病的外裴二氏试验(Weil felix test)等。
2.间接凝集反应(indirect passive agglutination) 是可溶性抗原或抗体吸附于与免疫无关的微球载体上,形成致敏载体(免疫微球),与相应的抗体或抗原在电解质存在的条件下进行反应,产生凝集,称为间接凝集或被动凝集;实验室常用的载体微球有人O型血红细胞、绵羊或家兔红细胞、聚苯乙烯乳胶、活性炭等,根据应用的载体种类不同,分别称为间接血凝、间接乳胶凝集及间接炭凝试验等。本试验主要用于某些传染病如钩端螺旋体抗原和原发性肝癌的早期诊断。间接凝集反应扩大了凝集反应的应用范围,其发展取决于载体,修饰载体使其带有化学活性基团,或选用吸附力强、稳定性高和带有色素的载体,必将演化出新的方法。
3.间接凝集抑制试验(indirect agglutination inhibition test) 将可溶性抗原与相应抗体预先混合并充分作用后,再加入抗原致敏的载体,此时因抗体已被可溶性抗原结合,阻断了抗体与致敏载体上的抗原结合,不再出现凝集现象,称为间接凝集抑制试验。临床常用的免疫妊娠试验(immune pregnancy test)即属此类。若以红细胞作为载体则称为间接血凝抑制试验。
所有上述凝集试验均可划分为正向和反向凝集试验,以已知抗原测抗体的凝集试验为正向凝集试验,通常“正向”两字省略,反之,为反向凝集试验。
4.协同凝集试验(co-agglutination) 以金黄色葡萄球菌为载体,利用其细胞壁中的A蛋白(SPA)具有结合人及多种哺乳动物IgG Fc段的特性。将特异性抗体结合至金黄色葡萄球菌菌体,其Fab段暴露于菌体表面,遇到相应抗原时与之结合,即可导致金黄色葡萄球菌凝集(图18.2)。称为协同凝集试验。常用于早期诊断流脑、伤寒、菌痢及布鲁氏菌病。
5.抗人球蛋白试验(anti-human globulin reaction) 机体受抗原刺激后,除可产生完全抗体外,在某些病人(先天性溶血性贫血)也可产生不完全抗体(IgG),后者虽能与抗原结合,但不出现肉眼可见反应现象。Coomb等把含有不完全抗体血清球蛋白注射到异种动物体内,使其产生抗人球蛋白抗体,将该抗人球蛋白抗体加入到颗粒性抗原与相应的不完全抗体复合物中,就能出现肉眼可见的凝集现象,称为抗人球蛋白试验,又称Coomb's试验。主要用于检测Rh抗体及布鲁氏菌抗体。