为方便广大考生复习,医学教育网整理了临床医学检验技士考试关于B细胞功能的检测的相关内容,以供参考。
1.空斑形成细胞(PFC)
检测是体外检测B细胞功能的一种方法。该法最早用于实验动物的PFC测定。是以SRBC作为抗原免疫小鼠,从免疫小鼠脾脏分离淋巴细胞或直接用脾细胞,将其与高浓度SRBC混合于琼脂中,经37℃,5%CO2温育后,在补体参与下抗体形成细胞周围的SRBC溶解而形成溶血小区,即溶血空斑(plaque)。一个空斑代表一个抗体形成细胞,空斑的数量表示抗体形成细胞的多少。IgM参与本反应,固定补体能力强,可直接激活传统途径,导致SRBC溶解,称直接法。若检测其他类别免疫球蛋白的抗体形成细胞,需在试验系统中加入相应的第二抗体才能使SRBC溶解形成空斑,称间接空斑形成试验。近年来,已应用SPA致敏的SRBC结合抗人球蛋白来检测人的抗体形成细胞,此法称SPA-SRBC溶血空斑试验。在此检测系统中加入抗人Ig,能与受检细胞产生的Ig结合成复合物,并通过复合物中抗人IgFc段与致敏SRBC上的SPA结合,激活补体而使SRBC溶解。空斑形成细胞的检测,有助于免疫应答动力学的研究和探讨药物对机体免疫状态的影响。是目前研究B细胞抗体产生功能的重要手段。
2.定量溶血分光光度法(QHS)
该法又称B细胞介导的红细胞定量溶血分光光度法,是根据溶血空斑试验的原理衍化而来,医学教|育网搜集整理可用以测定由B细胞产生和分泌的抗体裂解红细胞所释放的血红蛋白(以吸光值表示),从而反映机体的体液免疫功能。试验时,将免疫的脾细胞与SRBC及新鲜豚鼠血清等体积混合,于37℃水浴1小时,离心后测上清吸光值,其与产生抗体的量成正比。
3.ELISA-空斑试验(ELISA-plaque assay)
又称酶联免疫斑点试验(ELISPOT)。该法与ELISA不同之处是,加入的待检标本是细胞,而非可溶性物质;所使用的底物可形成不溶性终产物。ELISPOT不仅可应用于B细胞分泌抗体功能的测定,也能检测分泌细胞因子的T细胞和巨噬细胞。现已有应用该技术于计数类风湿因子分泌细胞的报道,但尚未在临床推广。