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细菌L型是细菌壁缺陷从而生物学特性发生改变的一种细菌，是细菌在不利环境下种系保存的一种形式。细菌L型检查对感染病原菌的确定及抗生素合理选择有重要意义，多采用培养观察的方法。
1、标本采集：
应尽量采集无杂菌污染的组织或液体标本。胸水、腹水及尿液标本，应加20%蔗糖无菌溶液，以保持高渗；血液标本应接种高渗肉汤增菌培养。如增菌肉汤出现轻度混浊或沉淀，再分离接种于L型选择平板或血平板。
2、培养方法：
（1）L型检查程序：将标本接种到高渗肉汤增菌培养1-7天，然后转种于L型平板和血平板37℃培养2-7天。L型菌在L型琼脂平板上典型菌落为“荷包蛋”样。
（2）检验报告：
1）血平板无菌生长，L型平板有菌落生长，可报告检出细菌L型；
2）血平板中菌落细小，不易刮下。涂片检查细菌呈多形性，细胞壁缺损，L型平板中有L型菌落，报告检出L型；
3）血平板及L型平板均有菌落生长。涂片有原菌及L型两种形态特征，可报告细菌型及L型同时存在，并分别作药敏试验以提供临床用药参考。
