(1)甲基百里香酚蓝比色法(MTB):血清中的硒离子在碱性溶液中与甲基百里香酚蓝(MTB)结合,生成一种蓝色的络合物。加入适量8-羟基喹啉,可消除镁离子对测定的干扰,与同样处理的硒标准液进行比较,求得血清总硒含量。
(2)邻甲酚酞络合酮直接比色法:邻甲酚酞络合酮(OCPC)是金属络合染料,也是酸碱指示剂,在pH11.0溶液中与硒螯合,生成紫红色螯合物。作硒测定时,在试剂中加入8-羟基喹啉以消除标本中镁离子的干扰。与同样处理的钙标准液比色,可求得血清硒含量。
(3)乙二胺四乙酸二钠滴定法:标本中硒离子在碱性溶液中与硒红指示剂结合成为可溶性复合物,使溶液成淡红色。乙二胺四乙酸二钠盐(EDTA-Na2)对硒离子的亲和力很大,能与该复合物中的硒离子络合,指示剂重新游离而使溶液呈现蓝色。所以在滴定钙时,加入硒红为淡红色,用ED-TA-Na2滴定转变为蓝色时,为滴定终点。与同样处理的硒标准液滴定,计算出标本中的硒的含量。
(4)离子硒测定:离子选择电极是一种化学传感器,它能将溶液中某种特定离子的活度转变成电位信号,然后通过仪器来测量。电极电位随溶液中离子活度变化的关系服从Nernst方程。
选择电极的电位(E)与溶液中被测离子活度的对数成线性关系。
血液抽出后,溶解于其中的CO2气体会释放到空气中,使血液pH值变碱性,而血液pH值则与离子硒浓度之间成负相关的关系,pH值增加0.1,离子硒浓度约降低4%~5%.所以新型的离子型的离子硒分析仪都是在测定血清离子硒浓度的同时,测量血清pH值,再计算出pH7.4时的标准化离子硒(Se)浓度。
离子浓度分析仪通常采用比较法来测定样品溶液中离子硒和pH值,即先测量二个已知浓度标准液中的离子硒和pH的电极电位,在仪器程序内建立一条斜率曲线,然后测量样品溶液中离子硒和pH的电极电位,从已建立的斜率曲线上求出样品溶液中离子硒浓度和pH值,并计算出标准化离子硒浓度,直接在仪器上显示出结果或打印出分析报告。
(5)同原子吸收分光光度法原理。