【原理】
急性淋菌性尿道炎病人常有大量黄色脓性分泌物。在有些脓细胞内可有许多淋球菌。淋球菌革兰染色呈阴性反应,具有特殊的菌体形态。因此,取病人尿道分泌物制成涂片后做革兰染色,检查有无典型细胞内革兰阴性双球菌,可作初步诊断的依据。
【方法】
1.先用灭菌等渗盐水的拭子揩洗尿道口,然后用手指由后向前挤出脓液,蘸取脓液后轻轻涂布于载玻片上。待自然干燥后加热固定,染色,镜检。常用革兰染色,也可用美蓝染色。
2.涂片后,待自然干燥后火焰固定,
革兰氏染色:结晶紫染色1min。
碘媒染液染色1min。
乙醇丙酮脱色1min左右。
石炭酸复红复染1min。
晾干后油镜镜检。
【结果】
在急性病人的尿道脓性分泌物革兰染色涂片中,常可见到大量红色多形核白细胞。在有些细胞中吞噬有淋球菌。淋球菌为革兰阴性,呈卵圆形或圆形,常成对排列,接触面扁平或稍凹。菌体长约0.7m,宽约0.5m。但两菌大小可有差异。多数多形核细胞中并不含淋菌,但不少脓细胞中常含有一至数对,甚至20对30对淋球菌,淋球菌常存在于细胞浆内。
在病期较长的淋病病人的涂片中淋球菌比较少,有时呈单个、四联和八叠状,位于细胞外。对有些菌有时难以下结论,需进行培养和鉴定。
【注意事项】
1.涂片时不要用力涂擦,而应将棉拭在玻片上轻轻滚动,因急性病人诊断标准为见到“细胞内革兰阴性双球菌”。涂擦过劲,细胞破裂或变形,菌从细胞内逸出,会造成诊断上的混淆。
2.涂片厚薄要合适。涂片过厚,加之染色过程中脱色时间不足,革兰阴性菌也会呈现紫色。因此,脱色时间要视涂片厚薄而定。在大量染片时,最好用一已知的革兰阳性菌(如葡萄球菌)和阴性菌(如大肠杆菌)作对照。
3.固定涂片,只要将涂片迅速通过火焰2~3次,避免加热过度使细胞变形扭曲。当把加热的涂片放到手背上时应不感到太烫。
4.不推荐用涂片检查来诊断淋菌性直肠和咽部的感染,也不推荐用作判愈。
【临床意义】
涂片检查方法简便、有效、价格低廉且有一定的敏感性和特异性。但其特异性随着取材部位的不同而有所不同。例如,从男性尿道取材特异性高,而从女性宫颈取材特异性低。因女性宫颈分泌物中杂菌很多,有的在形态上很像淋球菌。因此,世界卫生组织不推荐用涂片法来检查女性病人。